Phòng thí nghiệm Giống phân tử tại Đại học Nông nghiệp Trung Quốc (CAU) đã đạt được những kết quả tốt đẹp trong lĩnh vực cải tiến di truyền của gạo, lúa mì và các cây trồng khác. Trong việc chiết xuất axit nucleic, một phần quan trọng của giống phân tử, quy trình thủ công truyền thống giới hạn khả năng xử lý mẫu. Số lượng mẫu lớn được xử lý hàng ngày khiến việc pipet thủ công không chỉ kém hiệu quả mà còn dễ gây ra mệt mỏi và sai sót trong quá trình vận hành.
PRCXI Nền tảng Công việc Toàn bộ Năng lực
Để phá vỡ những nút thắt này và cải thiện hiệu quả cũng như tính ổn định của các thí nghiệm, Đại học Nông nghiệp Trung Quốc (CAU) đã mua các trạm pipetting PRCXI SC9000 (thủ công) và SC9200/SC9300 (hoàn toàn tự động) sau nhiều lần điều tra và so sánh. Sau lần sử dụng đầu tiên và xác minh dữ liệu trong một tòa nhà phòng thí nghiệm, với những lợi thế đáng kể của từng phòng thí nghiệm để giới thiệu lẫn nhau, đã có sự giới thiệu tích lũy gần 20 bộ trạm pipetting PRCXI.
Tổng quan về quy trình cho loại thí nghiệm này:
(Lưu ý: Do tính bảo mật của nội dung thí nghiệm của khách hàng, quy trình thí nghiệm này được tóm tắt theo loại thí nghiệm, không phải theo quy trình thực tế của khách hàng, và chỉ dành cho tham khảo của các khách hàng cùng loại.)
Chuẩn bị thiết bị:
Bộ làm việc pipetting PRCXI, đĩa well 96-, đầu pipet, kệ từ tính, đĩa PCR, bể chứa.
Quy trình thí nghiệm:
① Add 100 μL of sample and 100 μL of lysis buffer to each well of the 96-well plate, and mix thoroughly by pipetting up and down 5 times using the workstation.
Trộn kỹ huyền phù hạt từ tính Vortex trước khi sử dụng, thêm 200 µL vào mỗi giếng phản ứng, và trộn bằng cách hút và đẩy 3 lần bằng pipet sử dụng trạm làm việc.
Ủ ít nhất 2 phút để cho phép các hạt từ tính liên kết hoàn toàn với axit nucleic.
Đặt đĩa tốt 96- lên giá từ tính, để yên trong 1 phút, sau đó hút và loại bỏ dung dịch trong khi vẫn trên giá ..
Gỡ đĩa ra khỏi giá đứng từ tính, thêm đệm rửa vào mỗi giếng, trộn bằng cách hút và nhả 5 lần, và ủ trong 2 phút.
Đặt đĩa trở lại trên giá từ tính, để im trong 1 phút và bỏ đi phần dịch nổi.
Loại bỏ đĩa khỏi giá từ tính, thêm dung dịch rửa vào từng giếng, và trộn bằng cách hút và thả pipet lên xuống 5 lần.
Đặt đĩa lên giá từ tính, để trong 1 phút và loại bỏ phần dịch trên.
Thêm dung dịch rửa vào mỗi giếng phản ứng, trộn bằng cách hút và đẩy 3 lần, và ấp trong 1 phút.
Chuyển đĩa sang giá từ tính, cho nó lắng xuống trong 1 phút, sau đó chuyển dịch nổi sang đĩa PCR sạch (dịch nổi chứa axit nucleic)
Sản phẩm này sử dụng máy nghiền đồng nhất hoặc máy phá tế bào để phá vỡ thành tế bào thực vật, giải phóng axit nucleic (DNA hoặc RNA). Dưới điều kiện đệm ly giải, axit nucleic đặc biệt liên kết với bề mặt của hạt từ. Các bước rửa tiếp theo loại bỏ tạp chất như protein và polysaccharid. Cuối cùng, axit nucleic được elute ra khỏi hạt từ bằng cách sử dụng đệm elution. Các axit nucleic đã tinh khiết có thể được sử dụng trực tiếp cho các ứng dụng hạ nguồn, bao gồm phát hiện PCR, giải trình tự gen và nhiều hơn nữa.
Bàn pipet từ PRCXI đã cải thiện đáng kể hiệu suất của phòng thí nghiệm sau khi được đưa vào sử dụng. Độ chính xác cao của thiết bị, cho dù là kiểm soát thể tích pipet hay kiểm soát độ cao pipet, đã hiệu quả tránh mất mẫu và ô nhiễm chéo, và cải thiện đáng kể tính ổn định và độ tin cậy của kết quả thí nghiệm.
Ngày nay, công việc chiết xuất axit nucleic trong phòng thí nghiệm đã trở nên hiệu quả và chính xác hơn, điều này cung cấp hỗ trợ mạnh mẽ cho sự tiến bộ hơn nữa của nghiên cứu cải tiến di truyền cây trồng.